调控油茶果生刺盘孢bZIP转录因子CfAp1的生物学功能
[目的]研究油茶炭疽病的主要流行致病菌果生刺盘孢菌bZIP转录因子CfAp1的生物学功能,以期阐明果生刺盘孢菌致病的分子机制,为油茶炭疽病的防治提供理论依据.[方法]提取果生刺盘孢菌全基因组DNA,根据同源重组原理构建CfAP1基因敲除载体片段,采用PEG介导法把该片段转化至果生刺盘孢菌野生型菌株的原生质体中,验证筛选突变体菌株;PCR扩增果生刺盘孢菌含有启动子的CfAP1基因回补片段,构建回补载体pYF11::CfAP1;采用PEG介导法把回补载体pYF11::CfAP1转化至果生刺盘孢菌突变体菌株的原生质体中,获得回补菌株△Cfap1/AP1.测定野生型菌株、突变体菌株△Cfap 1-8及基因回补菌株△Cfap1/AP1在生长发育、附着胞形成、外界胁迫和致病力等生物学表型.[结果]果生刺盘孢菌中具有1个与灰色大角间座壳(稻瘟菌)bZIP转录因子MoAp1直系同源的基因,命名为CfAP1;该基因全长1 804 bp,编码566个氨基酸,该蛋白含有1个碱性亮氨酸链(bZIP)结构域、2个PAP1结构域和2个未知功能的结构域;与野生型和回补菌株相比,突变体△Cfap1-8生长速率没有明显影响,但气生菌丝显著减少;通过测量产孢量,发现突变体△Cfap1-8的分生孢子显著减少;△Cfap1-8在含2.5、5 mmol·L-1 H2O2和0.7 mol·L-1NaCl的PDA平板上菌丝生长受到明显抑制;致病力测试结果表明,果生刺盘孢菌基因敲除突变体△Cfap 1-8对无伤和有伤油茶叶片的致病力下降明显,与野生型和回补菌株的致病力差异显著;突变体分生孢子产生附着胞数量减少且膨压降低.[结论]转录因子CfAp1参与调控油茶果生刺盘孢菌的生长发育、产孢、致病力以及响应外界氧压胁迫和渗透压胁迫过程.
油茶、果生刺盘孢菌、bZIP转录因子、CfAp1、致病力
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S763.15(森林保护学)
湖南省自然科学基金;大学生科技创新项目
2020-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
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