8年生嫁接转基因杨树Bt毒蛋白的表达与运输
【目的】研究经历多年生长和对复杂自然环境适应后，嫁接的8年生转基因741杨中外源 Bt基因是否稳定存在及表达，探索成年树木 Bt 毒蛋白的运输部位、运输量、运输的方向性和积累等规律。【方法】利用转BtCry1Ac基因741杨与未转基因741杨互为砧木和接穗进行嫁接，在自然条件下生长8年后，对2种不同嫁接方式杨树砧木和接穗的 BtCry1Ac基因进行 PCR检测和验证，利用 ELISA技术对成年嫁接杨树的不同部位、不同组织进行毒蛋白含量检测。【结果】BtCry1Ac基因的PCR检测结果表明，Pb29/741嫁接杨中接穗部分和741/Pb29嫁接杨中砧木部分均扩增出与阳性对照大小一致的特异性条带，其余非转基因部分和阴性对照未扩增出特异性条带，证明 Bt基因在嫁接杨树的转基因部分稳定存在，未发现外源基因丢失现象。ELISA 检测表明，2种不同嫁接方式处理的741杨砧木和接穗的叶片、韧皮部、木质部和髓中均检测到 Bt毒蛋白存在，证明 Bt基因在8年生转基因嫁接741杨中稳定表达，且 Bt毒蛋白可以在成年嫁接741杨的砧木和接穗间运输。Pb29/741成年株中，根部为非转基因部分，地上枝干部分为转基因组织，地上转基因组织能够表达 Bt 毒蛋白，其含量呈现出树冠外侧向内侧逐渐升高，树干部分向下又逐渐降低的趋势，且可以向根和树干基部非转基因组织运输和积累，以韧皮部运输为主。741/Pb29成年株中，根部为转基因部分，地上枝干为非转基因组织，根和树干基部组织也可以表达 Bt毒蛋白，且可以由根部和干基部由枝干向树冠外侧运输并积累，以韧皮部运输为主；非转基因枝干部分呈现出树干向上逐渐降低，树冠内侧向外侧逐渐升高的趋势。【结论】尽管嫁接方式不同，嫁接的转基因杨树经历8年生长和复杂自然环境的影响和适应后，Bt毒蛋白的运输都呈现出由转基因组织向非转基因组织运输现象，毒蛋白含量呈现出类似由源向库运输和积累的趋势。转基因杨树可以通过传统嫁接方式在生产上应用，以提高转基因林木的生态安全性。
转基因杨树、嫁接、Bt毒蛋白、基因表达、蛋白运输
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S718.46;S722.3+6(林业基础科学)
国家自然科学基金;国家林业局项目（非规范项目名称）
2016-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
46-52
