福建柏总DNA的快速简便提取和鉴定

摘要：

本文介绍了福建柏Fokienia hodginsii (Dunn) Henry et Thomas总DNA的提取介质组成分,建立了一个快速、简便且高效提取和鉴定福建柏鲜叶、干叶、种子总DNA的方法.该方法所提DNA的产率分别为:150～250μg/g鲜叶,100～150μg/g干叶和140～160μg/g种子;绝大多数粗提总DNAOD260/OD280=1.80±0.02;提取的鲜叶、种子和单种子胚乳总DNA皆为48kb,而干叶总DNA为50Kb,都适于限制性酶切和RAPD反应;一般实验时间为4h.该方法既不需氯化铯梯度离心和柱层析纯化,也不需氯仿:异戊醇抽提,粗提的总DNA样品不经RNase消化即可用于RAPD反应或经RNase消化用于限制性酶切,因此,具有高产率、高纯度、高质量和快速简便等优点.尤其是它所提取的干叶DNA,适于限制性酶切和PCR反应,解决了取材上的不便.实验中还发现:(1)提取DNA之前去除叶绿素与否,对提取福建柏总DNA无明显影响.(2)只有去除RNA的福建柏总DNA样品,才能被限制性内切酶完全切开.(3)RAPD模板中含RNA及一定量的蛋白质,均不影响扩增效果.(4)同一个体的鲜叶、干叶、种子总DNA样品,皆可得到完全一致的扩增产物.

关键词：福建柏、总DNA提取、提取介质、限制性内切酶消化、RAPD

所属期刊栏目：35

分类号：S7(林业)

资助基金：福建省自然科学基金;福建省教育厅科研项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：51-56