尖叶假龙胆含药血清对H/R损伤H9c2细胞自噬及凋亡影响的研究

摘要：

目的 探究尖叶假龙胆含药血清对H9c2细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型的保护作用及其对自噬与凋亡水平的调节.方法 通过缺氧3 h、复氧3 h建立H9c2细胞H/R模型.实验分为Control组、H/R组、GEN+H/R组、GEN+Rap(自噬激活剂)+H/R组.应用CCK-8法观察尖叶假龙胆含药血清对心肌细胞活力的影响,ELISA法测定血清中LDH含量;采用Annexin Ⅴ-FITC双染法流式细胞技术,进行H9c2细胞凋亡情况检测;采用Western Blot技术检测心肌细胞Beclin1、LC3Ⅱ、Caspase3蛋白表达水平.结果(1)CCK-8及LDH结果显示:与Control组比较,H/R组细胞活力明显下降,细胞培养液LDH漏出量增加(P＜0.01);与H/R组比较,GEN+H/R组细胞活力明显上升,LDH漏出量下降(P＜0.01);与GEN+H/R组比较,GEN+Rap+H/R组细胞活力明显下降,细胞培养液LDH漏出量增加(P＜0.01).(2)Annexin V-FITC双染法流式细胞术的实验结果显示:与Control组比较,H/R组细胞凋亡率显著升高(P＜0.01);与H/R组比较,GEN+H/R组可明显降低H/R诱导的H9c2细胞凋亡率(P＜0.01);与GEN+H/R组比较,GEN+Rap+H/R 组细胞凋亡率增加(P＜0.01).(3)Western Blot 结果显示:与 Control 组相比,H/R 组的 Beclin1、LC3 Ⅱ、Caspase3 蛋白表达水平均明显升高;GEN+H/R组Beclin1、LC3Ⅱ、Caspase3蛋白表达水平与H/R组相比明显降低;与GEN+H/R组比较,GEN+Rap+H/R组Beclin1、LC3 Ⅱ、Caspase3蛋白表达水平均明显升高.结论(1)尖叶假龙胆含药血清能够改善H9c2细胞缺氧/复氧损伤程度,降低细胞凋亡率.(2)尖叶假龙胆含药血清可能通过降低自噬过表达从而抑制凋亡发挥对心肌细胞的保护作用.

关键词：尖叶假龙胆、缺氧/复氧、H9c2细胞、自噬

所属期刊栏目：49

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;黑龙江省博士后基金项目;全国基层名老中医药专家传承工作室建设项目

在线出版日期：2023-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：192-197,后插4