m6A甲基转移酶KIAA1429转染对结肠癌细胞增殖的影响及机制探讨

摘要：

目的 观察m6A甲基转移酶KIAA1429转染对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 通过慢病毒转染的方法在人结肠癌细胞RKO中构建稳定敲低KIAA1429的对照组和实验组细胞系,将其分别命名为sh-NC组、shKIAA1429组,在人结肠癌细胞LS180中构建稳定过表达KIAA1429的对照组和实验组细胞系,将其分别命名为OE-NC组、OE-KIAA1429组.采用Western blotting法检测KIAA1429蛋白来验证转染效率,采用CCK-8实验和平板克隆实验检测KIAA1429转染对结肠癌细胞增殖的影响,通过差异基因的富集分析预测KIAA1429转染对结肠癌细胞增殖的影响机制,采用流式细胞术检测KIAA1429转染对细胞周期的影响,采用Western blotting法观察OE-NC组和OE-KIAA1429组细胞内E2F1、CyclinB1、p21蛋白变化.结果 sh-NC组、sh-KIAA1429组KIAA1429蛋白相对表达量分别为0.979±0.028、0.299±0.138,两组比较P=0.002;OE-NC组、OE-KIAA1429组KIAA1429蛋白相对表达量分别为0.446±0.104、0.899±0.153,两组比较P=0.026.CCK-8实验和平板克隆实验结果显示,KIAA1429显著促进了结肠癌细胞的增殖(P均<0.05).KEGG富集分析提示差异基因主要于细胞周期相关的信号通路得到富集,GO富集分析提示差异基因的功能与遗传物质的复制及细胞周期相关.流式细胞术结果显示,RKO细胞中sh-NC组和sh-KIAA1429组的G0/G1 期所占百分比分别为52.07％±1.00％、58.57％±0.98％,两组相比P=0.003;LS180细胞中OE-NC组和OE-KIAA1429组的G0/G1 期所占百分比分别为68.37％±0.82％、62.40％±1.34％,两组相比P=0.006.OE-NC组CyclinB1、E2F1、p21蛋白相对表达量分别为0.491±0.116、0.661±0.132、1.007±0.058,OE-KIAA1429组分别为1.254±0.169、1.125±0.135、0.725±0.110,两组相比P均<0.05.结论 m6A甲基转移酶KIAA1429通过调控细胞周期信号通路进而促进结肠癌细胞增殖.

关键词：m6A甲基转移酶、KIAA1429、病毒转染、细胞增殖、细胞周期、结肠癌

所属期刊栏目：4

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金82103322,KIAA1429;STING

在线出版日期：2023-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24