家兔Zfx基因shRNA干扰载体构建及验证

摘要：

研究主要是为了构建出针对家兔Zfx基因的shRNA重组载体及效果验证.根据家兔Zfx基因mRNA序列特征,设计出3条shRNA片段,再与线性化的pLL 3.7载体进行连接重组,最后经过qRT-PCR检测Zfx基因mRNA表达量筛选出有效重组表达载体并通过体内试验进行效果验证.结果表明:试验组shRNA-c和shRNA-f干扰效率分别为74％和67％,与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);试验组shRNA-e干扰效果为17％,与空白对照组相比差异不显著(P>0.05).用shRNA-c和shRNA-f进行体内试验,结果显示,两试验组雄性率分别为44.92％(P>0.05)和33.16％(P<0.01).本试验成功构建针对家兔Zfx基因的重组载体,体内试验显示子一代出现性别偏移,说明Zfx基因对动物的性别决定有一定作用,关于导致体内验证出现反转的原因仍需进一步验证.

关键词：Zfx基因、shRNA、pLL3.7慢病毒骨架载体

分类号：S829.1(家畜)

资助基金：兵团科技支疆项目:Zfy基因干扰生产绵羊性控精液研究与示范2014AB012

在线出版日期：2019-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-19