H1N1亚型三个谱系猪流感病毒RT-PCR鉴别诊断方法的建立
根据GenBank中甲型、古典型和类禽型三个谱系H1N1猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的血凝素(Haemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计了3对特异性引物,建立了H1N1亚型三个谱系SIV的RT-PCR快速鉴别诊断方法.该方法能够对甲型、古典型和类禽型三个谱系的H1N1亚型SIV做出准确诊断,扩增片段大小分别为476、293和997 bp.敏感性试验结果显示,该方法对三个谱系病毒的最低检测限分别为1 896、1 655和1 459拷贝/L;特异性试验显示,该方法可特异性检出古典型、类禽型和甲型H1N1三个谱系的SIV,而与H5、H7和H9亚型流感病毒、猪瘟病毒及猪繁殖与呼吸不障碍综合征病毒均无交叉反应;重复性试验表明,3次重复检测结果具有良好的一致性.以上结果表明,该RT-PCR分型诊断方法的敏感性、特异性和重复性良好,为有针对性地对猪流感采取综合防控措施提供重要技术支撑,具有良好的应用前景.
猪流感病毒、甲型H1N1、古典型H1N1、类禽型H1N1、RT-PCR、鉴别
S855.3(动物医学(兽医学))
辽宁省科学事业公益研究基金项目2014001012;辽宁省“百千万人才工程”人选项目择优资助2014921026
2018-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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