大肠杆菌四环素类抗生素主要耐药基因PCR检测方法的建立

摘要：

本研究通过对tet(A)、tet(B)、tet(C)和tet(M)基因的序列分析,利用Primer Premier 5.0软件设计并合成了4对特异性引物,建立了四环素类抗生素主要耐药基因的PCR检测方法.通过反复试验确定这4对特异性引物的最佳退火温度均为55℃.灵敏性试验和特异性试验表明这4对特异性引物能够在核酸浓度分别为1.36、10.8、0.206和136 pg/L时扩增出清晰地目的基因,并具有较高的特异性.稳定性与重复性试验表明本方法具有良好的稳定性.应用所建立的方法对25株辽宁地区猪源大肠杆菌中四环素类耐药菌株主要耐药基因进行检测分析,辽宁省猪源大肠杆菌中对四环素类的耐药性可能主要与tet(A)、tet(B)介导的主动外排机制有关,其次与tet(M)介导的核糖体保护机制有关.

关键词：大肠埃希菌、四环素类抗生素、耐药基因、PCR

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：辽宁省自然科学基金;编号:201402573

在线出版日期：2018-01-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

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