猪MEF2C基因慢病毒表达载体构建及C2C12细胞转染条件的优化

摘要：

MEF2C基因能够控制肌细胞分化过程中的基因转录,特别在骨骼肌、心肌和平滑肌中介导细胞的分化。本研究将猪 MEF2C 基因化学合成后经 Bam HI 和 Asc I 双酶切后克隆到慢病毒表达载体 pLen-ti6.3_MCS_IRES2-EGFP中，获得的重组质粒用限制性内切酶酶切分析和测序鉴定；利用慢病毒阴性对照侵染靶细胞C2C12来确定最佳MOI值以及靶细胞最适抗生素Blasticidin剂量。结果显示猪MEF2C基因成功克隆到慢病毒表达载体中；该重组质粒侵染靶细胞C2C12的最佳MOI值为300；靶细胞抗生素的筛选剂量为4μg/mL，维持剂量为3μg/mL上述试验为建立MEF2C稳定过表达细胞系提供了前期工作基础。

关键词：猪、MEF2C基因、慢病毒表达载体、C2C12细胞

分类号：S858.91(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然基金资助编号31272415/C170102

在线出版日期：2014-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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