10.3969/j.issn.1672-9692.2008.12.026
兔早期胚胎PCR性别鉴定体系的建立
根据兔SRY基因序列设计两对引物作为兔雄性特异性引物,根据兔APP基因序列设计1对引物作为内标引物,分别建立了兔早期胚胎性别鉴定的双重PCR和巢式PCR反应体系,在不同浓度的基因组DNA和兔早期胚胎上进行性别鉴定应用,同时,对兔SRY巢式PCR引物特异性进行了分析.结果表明,多重PCR扩增兔基因组DNA可以准确判定其性别,扩增灵敏度为100 pg基因组DNA;多重PCR鉴定24枚兔32细胞桑椹胚性别,只能对整胚成功鉴定.巢式PCR,公兔基因组DNA扩增出282 bp的SRY基因片段,母兔没有扩增产物,扩增灵敏度为10 pg;对24枚兔32细胞桑椹胚性别鉴定结果表明,巢式PCR可以对少至4个胚胎细胞进行准确鉴定,同一胚胎结果符合率为100%(24/24).SRY引物只对兔雄性基因组DNA特异,而其他动物(人、牛、绵羊、小鼠)雄性DNA及兔的冲卵液,均无PCR产物.
兔、胚胎性别鉴定、多重PCR、巢式PCR
S813.3(普通畜牧学)
2009-03-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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