用Sleeping Beauty转座子筛选肺癌相关基因及功能研究

摘要：

目的 探讨睡美人(SB)转座子筛选肺癌相关基因的应用.方法 采用Sleeping Beauty转座子插入T2/Onc盒子(T2/Onc cassette)诱变人支气管上皮细胞(HBEC)的模型,挑选阳性克隆,高通量测序筛选共同插入位点(CIS)及候选基因.在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系NCI-H1299中验证筛选出的COL11A1基因功能,采用CCK?8细胞增殖实验等检测NCI?H1299细胞系敲低COL11A1前后的增殖能力及其对顺铂的敏感性变化,采用Transwell细胞迁移、侵袭实验比较其迁移、侵袭能力变化.结果 使用转座子筛选中通用的蒙特卡洛模拟法确定CIS,以P<0.05为界,共找到252个CIS,包括675个候选基因.结果 显示,筛选出的COL11A1基因可以促进NCI?H1299细胞系增殖(P<0.01)、迁移(P<0.001)、侵袭(P<0.001)并介导其顺铂耐药(P<0.001).结论 本研究证明了使用SB转座子插入T2/Onc诱变HBEC的模型能够很好地筛选出肺癌相关基因,并证实了COL11A1可以促进NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭并介导顺铂耐药及上皮间质转换.

关键词：非小细胞肺癌、睡美人转座子、基因筛选、COL11A1

所属期刊栏目：23

分类号：R734(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81872295

在线出版日期：2023-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：118-126,134