10.3969/j.issn.1009⁃976X.2022.02.003
Pin1相互作用的长非编码RNA lncPIL⁃1调控乳腺癌恶性表型的研究
目的 探究与Pin1蛋白结合的长非编码RNA lncPIL?1对乳腺癌细胞增殖、迁移和干性表型的影响.方法 采用RNA免疫沉淀联合深度测序(RIP?seq)得到与Pin1特异性结合的长非编码RNA,并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)和紫外交联免疫沉淀(CLIP)进行验证筛选;利用小干扰RNA(siRNA)敲降乳腺癌细胞lncPIL?1的表达,利用慢病毒感染得到lncPIL?1过表达乳腺癌细胞株,并通过qRT?PCR实验检测敲降及过表达效率;采用平板克隆方法检测lncPIL?1对乳腺癌细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验检测lncPIL?1对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响;采用ALDEFLUOR法检测lncPIL?1对乳腺癌细胞干性表型的影响.结果 RIP?seq及验证实验显示,lncPIL?1在Pin1免疫沉淀复合物中富集.乳腺癌患者高表达lncPIL?1与总生存率低密切相关.平板克隆实验显示lncPIL?1不影响乳腺癌细胞生长.Transwell实验中过表达lncPIL?1会加强乳腺癌细胞的迁移能力,而敲降lncPIL?1会降低乳腺癌细胞的迁移能力;ALDEFLUOR检测结果显示敲降lncPIL?1明显抑制乳腺癌细胞干性表型.结论 lncPIL?1与Pin1特异性结合并与乳腺癌患者预后不良高度相关,具有促进乳腺癌细胞运动迁移及干性表型的能力,提示lncPIL?1有望成为新的乳腺癌治疗靶点.
长非编码RNA、Pin1、乳腺癌、迁移、肿瘤干细胞
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R737.9(肿瘤学)
国家自然科学基金81872370
2022-06-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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