寻常型天疱疮患者血清对HaCaT细胞Dsg、MMP-9表达的影响

摘要：

目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者血清对HaCaT细胞桥粒芯蛋白(Dsg)1、3和基质金属蛋白酶(MMP)9表达的影响及其参与PV棘层松解的可能机制.方法:用含5％PV血清的高糖DMEM培养基孵育HaCaT细胞,以正常培养组、健康血清组以及抗Dsg3抗体组(阳性对照组)作为对照.刮取细胞提取总RNA及蛋白质,Q-PCR检测Dsg1、Dsg3和MMP-9 mRNA转录水平,Western Blot检测Dsg1、Dsg3和MMP-9表达,荧光单克隆Dsg1/3抗体分别检测细胞表面Dsg1、Dsg3表达.结果:Q-PCR结果显示:与正常培养组比较,含5％PV血清培养组HaCaT细胞Dsg1、Dsg3、MMP-9基因的mRNA相对表达量分别上升约432％、402％、402％,而抗Dsg3抗体组分别上升约495％、488％、604％,PV血清组与正常培养组间有明显差异(P值均<0.05).Western Blot结果显示:与正常培养组相比,PV血清组HaCaT细胞表面Dsg1、Dsg3、MMP-9蛋白表达升高.Dsg1、Dsg3荧光单克隆抗体检测显示:PV血清组HaCaT表面Dsg1线状荧光消失,替代为颗粒状、团块状荧光颗粒分散于细胞表面和胞浆区域,而细胞表面Dsg3线状荧光仍然存在,但强度减弱.结论:PV血清能促进Dsg1、Dsg3和MMP-9转录及表达,Dsg3抗体可通过诱导角质形成细胞Dsg1蛋白内吞,削弱抗体补偿作用参与棘层松解.

关键词：寻常型天疱疮、基质金属蛋白酶、桥粒芯糖蛋白、内吞、棘层松解

所属期刊栏目：27

分类号：R758.66(皮肤病学与性病学)

资助基金：广州市科技计划项目编号:201904010352

在线出版日期：2020-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：295-300,306