10.3969/j.issn.1674-8468.2016.05.003
Wnt5a对HaCaT细胞的增殖、周期及血管内皮生长因子的影响
目的:以HaCaT细胞为细胞模型,探讨Wnt5a能否激活非经典Wnt5 a/Ca2信号传导途径,并检测其对HaCaT细胞增殖、周期和对血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨Wnt5a在银屑病发病中的作用机制.方法:采用CCK-8检测不同浓度Wnt5a重组蛋白对HaCaT细胞增殖的影响;利用流式细胞仪技术测定Wnt5a对HaCaT细胞周期和Ca2+浓度的影响;不同浓度Wnt5a和Frizzled5分别刺激HaCaT细胞后,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测HaCaT细胞内VEGF在mRNA和蛋白水平的表达变化.结果:5 μg/mL、15 μg/mL和25μg/mL的Wnt5a能够不同程度的提高HaCaT细胞的增殖能力,促进细胞周期从G1期向S期分化,其中15 μg/mL和25 μg/mL组与空白组相比具有明显差异(P<0.01).同时,15 μg,/mL和25 μg/mL的Wnt5a可增加HaCaT细胞内Ca2浓度(P<0.05).RTPCR和Western blot结果显示,Wnt5a和Frizzled5能不同程度的促进VEGF的表达,其中Wnt5a的效果更显著(P<0.05).结论:外源性Wnt5a能促进HaCaT细胞增殖和周期,并增加细胞内Ca2+浓度,进而激活Wnt5a/Ca2+非经典信号传导途径,从而促进VEGF的表达.
Wnt5a、HaCaT细胞、Ca2+浓度、VEGF
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R758.63(皮肤病学与性病学)
广东省医学科学技术研究基金B2014044;广东省皮肤病医院学科建设优势项目2013
2017-01-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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