miR-505通过靶向核因子-κB调控脂多糖诱导的巨噬细胞活性研究

摘要：

目的:探讨究微小RNA 505(miR-505)通过靶向调控核因子-κB(NF-κB)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响.方法:通过生物信息学方法预测miR-505和NF-κB潜在的结合位点,扩增NF-κB基因的3′端非编码区,同时对结合位点进行突变,将野生型(WT)及突变型(MUT)序列克隆至pSicheck2载体中,进行双荧光素酶报告实验.利用Liposome 3000将miR-505 mimics及inhibitor转染至RAW264.7细胞中,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot实验检测miR-505、NF-κB的表达.用脂多糖(LPS)及miR-505共处理RAW264.7细胞,采用CCK-8实验检测细胞的活力,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达.结果:双荧光素酶结果表明miR-505可与NF-κB的3'UTR端结合,且miR-505与NF-κB的表达呈负相关.CCK8结果提示miR-505可抑制LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;ELISA结果表明miR-505可抑制LPS作用下炎症因子TNF-α和IL-6的分泌.结论:miR-505可通过靶向作用NF-κB基因以抑制TNF-α和IL-6的分泌,并降低LPS对RAW264.7细胞的损伤.

关键词：微小RNA 505、核因子-κB、巨噬细胞、活性、脂多糖

所属期刊栏目：28

分类号：S854.43;R739;R563.8

资助基金：贵州省卫生健康委员会科学技术基金项目gzwjkj2015-1-048

在线出版日期：2023-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：203-206,221