SOE-PCR法构建新型PHA嵌合酶研究

摘要：

聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanonate,PHA)合酶是PHA合成过程中的关键酶,其活性和底物特异性决定PHA含量和单体组成.构建嵌合酶是改变PHA单体组成的一种有效方式.利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension,SOE-PCR)法,以富氧产碱菌和嗜水气单胞菌PHA合酶基因为亲本构建新的PHA嵌合酶.结果表明,带有新型嵌合酶基因的重组菌株AHRE可利用葡萄糖酸钠和果糖产生3HB.利用辛酸钠、月桂酸、油酸、辛酸钠和葡萄糖酸钠混合碳源,除3 HB和3 HHx外,还产生了新的单体组分3 HO.辛酸钠和葡萄糖酸钠混合碳源发酵,PHA含量最高,达57.54％.辛酸钠为单一碳源时,3HO单体组成含量最高,占PHA总量1.932％,证明嵌合酶构建成功.这为今后利用基因工程技术改变菌株PHA单体组成提供了有效方法,为获得具有更好材料学特性的PHA奠定了工作基础.

关键词：聚羟基饱和脂肪酸酯(PHA);PHA合酶;嵌合酶

所属期刊栏目：48

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：辽宁省自然科学基金指导计划;沈阳市科技创新平台建设计划;营口市企业博士双创计划

在线出版日期：2021-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：277-282