柱前衍生-超高效液相色谱法测定母乳中16种氨基酸的含量
以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行柱前衍生,以超高效液相色谱法测定了人初乳、过渡乳、成熟乳中的苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸和牛磺酸等16种氨基酸的含量,并与GB 5009.124-2016中氨基酸分析法(GB法)的测定结果进行对比.取解冻后的母乳0.22 mL,加入水、氢氧化钠溶液、盐酸溶液、L-正缬氨酸内标溶液和含0.1％(体积分数)苯酚的盐酸溶液,氮吹5 s,涡旋混匀后,于110℃水解(24±0.5)h.从液面下1 cm处取0.2 mL水解样品,加入氢氧化钠溶液和盐酸溶液,涡旋后过0.2μm尼龙滤膜.取上述滤液10μL,用AQC衍生试剂衍生,于55℃加热10 min,按照优化的仪器工作条件测定.在ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱上进行梯度洗脱分离,在检测波长260 nm处检测,内标法定量.结果显示,16种氨基酸标准曲线的线性范围为0.5～25μmol·L-1,检出限(3s)为2.5～10.7 mg·L-1.对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为95.0％～108％,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于9.0％.方法用于不同泌乳阶段母乳的分析,除了过渡乳和成熟乳中的组氨酸外,所得其他母乳中的氨基酸的测定值均显著高于GB法的(P<0.05),推测与前处理方法、仪器、取样量等的差异有关,具体原因还待进一步研究.
柱前衍生、超高效液相色谱法、氨基酸、母乳、方法比对
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O657.7(分析化学)
2022-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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