中性红褪色光度法测定白菜中过氧化氢酶活性
建立了一种中性红(NR)褪色光度法测定过氧化氢酶(CAT)活性的方法.称取20 g本地大白菜样品,研碎,用磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)定容至1000.0 mL,取稀释液1.00 mL于50 mL容量瓶中,再加入1 mmol?L-1 H 2 O 2基质溶液5.00 mL,在25℃下进行酶催化反应15 min后,立即加入0.01 mol?L-1酸性Fe3+溶液(内含0.02 mol?L-1 H 2 SO 4溶液)1.00 mL用于终止酶促反应(H 2 SO 4)和催化褪色反应(Fe3+),再加入5×10-4 mol?L-1 NR溶液3.00 mL,摇匀,在80℃水浴中进行褪色反应,25 min后加水定容.取适量样品溶液于1 cm比色皿中,以水为参比,于波长528 nm处测量其吸光度A.同时完成空白试验吸光度A 0测定,根据吸光度的变化 ΔA(ΔA=A 0-A)确定CAT的活性(E).结果表明:在10 min内,酶促反应符合一级动力学反应的特征,CAT活性E在0.3 U?mL-1内与 ΔA呈线性关系,检出限(3S/N)为0.0068 U?mL-1.对大白菜的叶、茎、根进行加标回收试验,CAT的含量依次为6.25,9.00,8.00 U?g-1,回收率均为104％,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.7％～3.4％.将大白菜茎部自然放置4 d后,CAT活性降至最初的30％.
中性红、褪色光度法、过氧化氢酶、活性、白菜
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O657.3(分析化学)
甘肃省高等学校科研项目;2019年度甘肃省高等学校创新能力提升立项项目
2020-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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