液相色谱-串联质谱法测定食品中的泛酸
提出用直接提取法将含有游离态泛酸的食品(如奶粉、米粉等)中将其分离.称取样品5 g,加入淀粉酶0.2 g和50 mL水摇匀后,在(55±5)℃的水浴中振摇酶解30 min.从此溶液中定量分取相当于0.5～5.0 g的样品,加入泛酸钙[13 C6、15 N]同位素内标溶液100μL,加水至20 mL,加入300 g·L-1乙酸锌溶液和150 g·L-1亚铁氰化钾溶液各0.4 mL作为沉淀剂,加水定容至25.0 mL,混匀,静置10 min后离心2 min.取其上清液并用0.22μm滤膜过滤,取其滤液按仪器工作条件进行液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析.用酶解法处理含有结合态泛酸的食品样品(谷、薯、肉、蛋、豆类及其制品1～5 g,新鲜果蔬5～10 g),于样品中加入pH 8.1±0.1 Tris缓冲溶液10 mL和水40 mL,并在121℃和加压条件下水解15 min,冷却,加水定容至100.0 mL,过滤,取滤液10.0 mL加入泛酸钙同位素内标溶液100μL,及三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液5 mL,将溶液置于冰浴中,相继加入0.08 mol·L-1碳酸钠溶液0.1 mL,0.02 g·mL-1碱性磷酸酶溶液0.4 mL,0.5 g·L-1鸽子肝脏提取液0.2 mL和水0.4 mL,混合均匀,加入甲苯1滴,在37℃反应8 h以上使泛酸游离.反应完成后,加水至20 mL,以下操作同直接提取法从加入沉淀剂起.在LC分离中,采用Waters BEH C18色谱柱和以不同比例的(A)1％(体积分数)甲酸溶液和(B)乙腈组成的混合液作为流动相进行梯度洗脱,按质谱条件测得泛酸的峰面积.泛酸标准曲线的线性范围为10～1500μgL-1,其检出限(3S/N)为3.0μg·kg-1.按标准加入法进行回收试验,测得回收率为91.0％～105％,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.46％～3.0％.应用本方法分析了奶粉及其他食品共53种样品,所测得泛酸含量的结果与国标法(微生物法)的测定结果的相对标准偏差均小于10％,并根据t检验的结果,表明本方法的测定值与国标法测定值之间无显著差异.
游离泛酸、总泛酸、液相色谱-串联质谱法、食品
56
O657.63(分析化学)
上海市科学技术委员会科研计划项目18DZ2201400
2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
326-331
