氟化钠通过JNK通路调控细胞凋亡致心肌细胞损伤的作用研究
[背景]氟可诱导心肌损伤.c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞凋亡过程中具有重要作用,但该通路在氟中毒对心肌细胞损伤中的作用仍为未知.[目的]探究氟化钠(NaF)对大鼠心肌细胞H9c2的毒性作用,以及是否通过JNK信号通路影响心肌细胞凋亡.[方法]按照NaF浓度及是否加入SP600125(JNK抑制剂),将大鼠心肌细胞分为对照组、SP600125组(SP组)、0.24 mmol·L–1 NaF组、0.48 mmol·L–1 NaF组、0.96 mmol·L–1 NaF组、0.96 mmol·L–1 NaF+SP600125组(NaF+SP组).将NaF染毒24 h的大鼠H9c2心肌细胞于荧光倒置显微镜下观察细胞形态,对处理24、48、72 h后的细胞采用CCK-8法检测细胞活力变化,采用荧光探针法检测处理24 h后的H9c2心肌细胞中活性氧(ROS)水平,采用实时荧光定量PCR法检测处理24 h后细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、JNK mRNA表达水平,采用Western blotting方法检测处理24 h后细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、p-JNK蛋白表达情况.[结果]与对照组相比,0.48、0.96 mmol·L–1 NaF处理24 h后细胞生长密度减少,NaF浓度增加后出现变圆细胞,镜下出现部分悬浮死细胞,并且NaF染毒处理细胞24 h后,0.48、0.96 mmol·L–1 NaF组细胞活力低于对照组(P<0.05),NaF处理细胞48、72 h后NaF各处理组的细胞活力均低于对照组(P<0.05);与对照组相比,NaF染毒培养心肌细胞24 h后,细胞内ROS水平升高,Bcl-2 mRNA表达有不同水平的下降,特别是0.48和0.96 mmol·L–1NaF组,Bax、Caspase-3及JNK mRNA表达水平明显增加,Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、Caspase-3、p-JNK蛋白表达水平升高(P<0.05);与0.96 mmol·L–1 NaF组相比,NaF+SP组细胞活力增加,ROS水平降低,Bax、Caspase-3与JNK mRNA表达水平降低,Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax、Caspase-3、p-JNK蛋白表达明显降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达有增加,但差异无统计学意义(P>0.05).[结论]过量氟暴露可诱导心肌细胞ROS产生增多,并可能激活JNK信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡,进而造成心肌细胞损伤.
氟化钠、H9c2心肌细胞、JNK信号通路、细胞凋亡、氧化应激、活性氧
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R114(卫生基础科学)
内蒙古自治区高等学校科学研究项目;内蒙古自治区自然科学基金项目
2023-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
224-229
