长链非编码RNA-GK3P在食管癌中的表达及其对癌细胞生物学功能的影响

摘要：

[背景]甘油激酶3假基因(GK3P)是位于人类染色体4q32.3区域的长链非编码RNA(lncRNA),其亲本基因甘油激酶基因与肿瘤发展有关.然而,lncRNA-GK3P在食管癌中的表达与作用机制尚不清楚.[目的]分析lncRNA-GK3P在食管癌组织、癌细胞中的表达情况,并探讨其对食管癌EC109细胞增殖、周期、凋亡的影响及机制.[方法]应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测lncRNA-GK3P在食管癌细胞(EC109)与永生化正常食管上皮细胞(Het-1A)以及41例食管癌组织与癌旁组织中的表达情况;采用siRNA敲低技术、质粒转染技术分别构建lncRNA-GK3P敲低和过表达的EC109细胞株,并将其分为4组:si-GK3P组(siRNA GK3P转染)、si-NC组(siRNA GK3P的空载体对照)、plasmid-GK3P组(GK3P过表达质粒转染)、plasmid-NC组(GK3P空载质粒对照);CCK-8法检测细胞活性、EdU法检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期,Western blotting测定细胞周期和凋亡相关蛋白Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2和Bax的表达变化.[结果]与癌旁组织相比,lncRNA-GK3P在食管癌组织中表达水平为前者的(2.91±0.61)倍(t=19.38,P<0.05);且相对于食管上皮细胞Het-1A,lncRNA-GK3P在食管癌EC109细胞中表达水平为前者的(3.15±0.27)倍(t=13.06,P<0.05).lncRNA-GK3P敲低后,细胞增殖受到抑制[si-GK3P组vs si-NC组,(27.21±1.11)％vs(37.95±0.93)％,P<0.05];细胞G0/G1期比例增加(P<0.05),S期比例增加(P<0.05),G2/M期比例减少(P<0.05);细胞凋亡增加[si-GK3P组vs si-NC组,(10.19±0.91)％vs(7.46±0.18)％,P<0.05];Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2表达下调,Bax表达上调.lncRNA-GK3P过表达后,细胞增殖增加[plasmid-GK3P组vs plasmid-NC组,(37.00±1.71)％vs(29.63±1.45)％,P<0.05];细胞G0/G1期比例减少(P<0.05),S期比例增加(P<0.05),G2/M期比例减少(P<0.05);细胞凋亡下降[plasmid-GK3P组vs plasmid-NC组,(5.27±0.07)％vs(9.71±0.19)％,P<0.05];Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2表达上调,Bax表达下调.[结论]lncRNA-GK3P在食管癌中高表达,通过调控Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2及Bax的表达,在食管癌EC109细胞中发挥促进细胞增殖、抑制凋亡的作用.

关键词：食管癌、长链非编码RNA、甘油激酶3假基因、增殖、凋亡、细胞周期

所属期刊栏目：38

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目;江苏省淮安市科技项目

在线出版日期：2021-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：701-708