氟咯草酮对肝细胞BRL-3A的毒性作用

摘要：

[背景]氟咯草酮(FLC)是一种广泛使用的除草剂.动物毒理研究发现FLC具有潜在肝毒性,但对FLC暴露肝细胞的毒性作用和机制的研究十分有限.[目的]探索FLC对大鼠肝细胞BRL-3A的毒性作用和潜在毒性机制.[方法]采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)考察0.1、1、10、100μmol·L1 FLC染毒24h后对BRL-3A肝细胞活性的影响,确定后续试验染毒浓度为1、10、100μmol·L-1.应用免疫荧光技术检测肝细胞内的活性氧(ROS)水平的变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测锰超氧化物歧化酶(SOD2)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的mRNA表达水平,采用流式细胞术检测肝细胞的死亡率及凋亡率,采用Western blotting法检测环氧合酶-3(Cox3)、凋亡促进因子Bax和B-淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达水平.[结果]相对于对照组:1、10、100μmol.L-1浓度FLC染毒肝细胞BRL-3A后,细胞存活率分别为(91.4±4.2)％、(73.5±13.1)％和(66.7±5.5)％(均 P＜0.05);10μmol·L-1 染毒细胞内 ROS水平增高至(126.2±12.4)％(P＜0.05);1～100μmol·L-1 的 FLC染毒后SOD2的 mRNA表达降低至(29.8±2.1)％、(25.5±2.2)％和(6.6±0.4)％,而 GSH-Px 的 mRNA表达降低至(63.6±4.2)％,(49.9±4.1)％和(26.5±2.1)％(P＜0.001);10、100 μmol.L-1 浓度 FLC 分别促进细胞凋亡率达(2.2±0.1)、(12.5±0.8)倍,Bax的蛋白表达增高至(1.2±0.1)、(1.4±0.1)倍(P＜0.001),Bcl-2的蛋白表达降低至(41.6±4.0)％和(41.9±3.2)％(P＜0.001),Bcl-2/Bax 值降低至(35.2±4.0)％和(30.9±3.1)％(P＜0.001),同时 Cox-3的蛋白表达下调至(84.1±8.0)％和(54.2±4.2)％.[结论]FLC对肝细胞BRL-3A具有明显的毒性效应,随浓度的升高而增强,其毒性机制可能是通过诱发肝细胞氧化损伤,进而促使细胞凋亡.

关键词：氟咯草酮、肝细胞、氧化应激、细胞凋亡、细胞毒性

所属期刊栏目：38

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：上海市自然科学基金项目;国家自然科学基金项目;上海市卫生健康委项目

在线出版日期：2021-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：649-653