10.13213/j.cnki.jeom.2021.20580
氧化应激参与溴乙酰胺致斑马鱼胚胎神经发育毒性
[背景]溴乙酰胺是一种饮用水消毒副产物,研究证实其具有细胞毒性和遗传毒性,但对于神经发育的毒性作用尚不明确.[目的]探究溴乙酰胺在斑马鱼胚胎期暴露所致神经发育毒性及可能机制.[方法]将野生型斑马鱼胚胎随机分为6组(每组n=30)进行染毒,分别为:对照组、溴乙酰胺各质量浓度(后称:浓度)(0.625、1.25、2.5、5、10mg·L-1)染毒组.染毒时间为受精后2h(2hpf)至96hpf.每天观察斑马鱼胚胎的死亡情况并更换培养液,最终统计72 hpf的孵化率和96hpf的死亡率、畸形率、体长.于120 hpf时检测斑马鱼幼鱼的运动行为能力,并进行结果统计.用二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为探针检测斑马鱼体内活性氧(ROS)水平.通过荧光定量PCR方法检测神经发育相关基因(dlx2、ngn1、elavl3、shha、mbp、syn2a)及氧化应激相关基因(Cu/Zn sod、gpx、cat、nrf2、ho-1)的表达情况.[结果]72hpf时,10mg·L-1溴乙酰胺染毒组斑马鱼胚胎的孵化率为88.40％,较对照组(100％)降低(P＜0.05).96hpf时,5、10mg·L-1溴乙酰胺染毒组斑马鱼胚胎的死亡率为48.10％和96.06％,较对照组(15.92％)升高(P＜0.05);2.5、5mg·L-1溴乙酰胺染毒组胚胎畸形率为21.38％和43.43％,也较对照组(1.94％)升高(P＜0.05);2.5、5 mg·L-1溴乙酰胺染毒组胚胎体长分别为5.21、4.94mm,较对照组(5.40mm)下降(P＜0.05).运动检测发现:与对照组相比,溴乙酰胺染毒组均出现运动距离下降和运动时间缩短的现象,差异具有统计学意义(P＜0.05).ROS染色发现,1.25、2.5、5 mg·L-1溴乙酰胺染毒组斑马鱼胚胎头部区域ROS表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).定量PCR检测结果发现:与对照组相比,神经发育相关基因dlx2在2.5、5mg·L-1染毒组表达下调,ngn1在5mg·L-11染毒组下调,elavl3、shha在1.25、2.5和5mg·L-1染毒组下调,mbp在1.25、5mg·L-1染毒组下调,syn2a在各染毒组均下调,差异具有统计学意义(P＜0.05);氧化应激相关基因Cu/Zn sod在2.5、5mg·L-1染毒组上调,gpx在5mg·L-1染毒组上调,cat、nrf2在1.25、2.5、5mg·L-1染毒组上调,ho-1在各染毒组均上调(P＜0.05).[结论]溴乙酰胺暴露后可能通过诱导氧化应激,抑制神经发育相关基因的表达,从而导致斑马鱼胚胎神经发育毒性.
饮用水消毒副产物、溴乙酰胺、斑马鱼、氧化应激、神经发育
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金项目81673203
2021-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
586-592
