10.13213/j.cnki.jeom.2020.19735
氧化石墨烯片层对小胶质细胞神经免疫效应的调控
[背景]氧化石墨烯(GO)广泛应用于神经生物学领域.近年来研究表明,GO能够参与神经系统的调节过程,但关于其神经免疫效应调控具体机制尚无相关报道.[目的]探究GO在脂多糖(LPS)和白细胞介素4(IL-4)诱导小胶质细胞M1经典活化表型与M2选择活化表型转化中的神经调控作用.[方法]在GO基底培养基和对照培养基上对BV2细胞进行培养,分别加入20 μg·L-1 LPS或IL-4诱导BV2细胞表型转化,分组为空白对照组、GO对照组、空白-LPS组、空白-IL-4组、GO-LPS组和GO-IL-4组.比较24h后培养上清中的细胞数量.利用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和流式细胞术分别检测BV2细胞表面M1表型标志物[如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞因子CD86]以及M2表型标志物[如重组人精氨酸酶1(Arg1)、白细胞介素-10 (IL-10)、细胞因子CD206]表达量的变化,同时使用分光光度法检测培养上清中一氧化氮(NO)的含量.[结果]与空白对照组相比,GO处理后的BV2细胞细胞计数降低(218.13±8.77和175.63±8.24,P<0.01).相比于空白-LPS组,GO-LPS组BV2细胞上M1表型标志物TNF-α、iNOS的mRNA相对表达量(8.16±0.26和5.35±0.42;45.64±2.03和30.39±1.84)以及CD86阳性细胞率[(14.65±0.85)%和(10.29±0.46)%]降低,并且培养上清中NO的含量[(19.62±1.07) μmol·L-1和(8.37±1.25) μmol·L-1]降低,M2表型标志物IL-10的mRNA相对表达量升高(1.63±0.09和2.09±0.15) (P<0.05).与空白-IL-4组相比,GO-IL-4组M1表型标志物iNOS的mRNA相对表达量增加(0.41±0.03和1.05±0.07),M2表型标志物Arg1以及IL-10的mRNA相对表达量下降(201.63±12.31和4.74±0.38;2.63±0.14和0.71±0.13),CD206的阳性细胞率和平均荧光强度下降[(17.01±1.03)%和(3.66±0.41)%;8893.2±347.62和1299.9±159.67] (P<0.01).[结论]GO抑制BV2小胶质细胞生长,并对LPS和IL-4诱导下的神经免疫效应所引起的BV2小胶质细胞向M1和M2表型的转化起到抑制作用.
氧化石墨烯、胶质细胞、BV2细胞、神经免疫、脂多糖、白细胞介素4
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金项目;北京市自然科学基金项目
2020-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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