亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞损伤中自噬和凋亡的关系

摘要：

[背景]砷可导致细胞损伤,引起细胞自噬和凋亡,而细胞自噬与凋亡之间目前没有明确界限,二者关系目前尚不明确.[目的]探讨亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中细胞自噬与凋亡的关系.[方法]HELF细胞株培养3d后传代,随机分为对照组、亚砷酸钠处理组(亚砷酸钠浓度分别为5、10、20 μmol/L)、自噬抑制组(20 μmol/L NaAsO2+5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤)、凋亡抑制组(20 μmol/L NaAsO2+20 J.mol/L Caspase抑制剂z-VAD-FMK),染毒48h后,MTT实验检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学改变.提取细胞上清液、蛋白,ELISA法测定上清液中白介素(IL)-1β、IL-6、干扰素受体(IFN)-α含量.Western blot检测自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平.Caspase试剂盒检测凋亡相关蛋白caspase3/7.[结果]各组细胞存活率在染毒12、24、48h后均低于对照组(P＜0.05).随着染毒浓度增加细胞形态学改变,由紧密的梭形逐渐变为松散的圆形.10、20 μmol/L砷染毒组HELF细胞上清液中IL-1β表达量升高(P＜0.05);各砷染毒组细胞培养上清液中促炎因子IL-6、IFN-α表达量高于对照组(P＜0.05);与20 μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组呈现促炎因子表达量升高的趋势,凋亡抑制组呈现降低的趋势.与对照组相比,砷染毒组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量呈升高的趋势,p62蛋白的表达量呈降低的趋势;与20 μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量降低(P＜0.05),p62蛋白表达量呈升高的趋势;凋亡抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达水平呈升高趋势,p62蛋白的表达水平呈降低趋势.随着染毒浓度增加,与对照组相比,10、20μmol/L砷暴露组凋亡相关蛋白caspase3/7表达量增多(P＜0.05);与20 μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组caspase3/7表达量升高(P＜0.05),凋亡抑制组表达量降低(P＜0.05).[结论]亚砷酸钠染毒后可引起HELF发生炎症反应、细胞自噬和凋亡,且细胞自噬与凋亡之间可能存在一定的拮抗关系.

关键词：砷、人胚肺成纤维细胞、炎性因子、细胞自噬、细胞凋亡

所属期刊栏目：36

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金81660532;内蒙古科技计划项目201502080

在线出版日期：2019-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：853-857,863