10.13213/j.cnki.jeom.2019.19091
绿原酸对反式二氢二醇环氧苯并[a]芘诱导的细胞凋亡的保护作用和相关分子机制
[背景]反式二氢二醇环氧苯并[a]芘(BPDE)是一种环境致癌物质,可引起细胞凋亡、氧化应激等多种改变.绿原酸(CGA)具有抗氧化作用,但其对BPDE诱导的细胞凋亡的影响尚不明确.[目的]本研究首先采用BPDE染毒,模拟烟草致支气管上皮细胞损伤,然后采用CGA干预,探索其抗凋亡作用及其潜在分子机制.[方法]预实验采用终浓度为0、25、50、100、150、200 μmol/L的CGA分别处理16HBE细胞2、4、8h.根据预实验结果,选择CGA 50 μmol/L预处理细胞4h后再进行BPDE 0.5 μmol/L染毒12h.实验分为对照组、CGA单独处理组(CGA 50 μmol/L)、BPDE单独处理组(BPDE 0.5 μmol/L)、CGA干预组(CGA 50 μmol/L+BPDE 0.5 μmol/L).采用Annexin V/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测凋亡通路相关蛋白caspase-3的剪切体(Cleaved caspase-3)、caspase-9的剪切体(Cleaved caspase-9)、p53、p21的表达水平.[结果]CGA 50、100 μmol/L组各时间点相对细胞活力与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);而150、200 μmol/L组处理时长为8h时,与对照组相比细胞活力下降(P＜0.05).与BPDE单独处理组相比,CGA干预组的细胞凋亡率下降(17.63％ vs 9.21％,P＜0.05),Cleaved caspase-3 (1.81 vs 1.34,P＜0.05)和Cleaved caspase-9 (2.13 vs 1.37,P＜0.05)蛋白相对表达量下降,二氯荧光素荧光强度下降(250.21±8.13 vs 199.14±6.74,P＜0.05),p53 (1.66 vs 1.25,P＜0.05)及p21 (1.64 vs 1.23,P＜0.05)蛋白表达量也下降.[结论]本研究证实CGA可以抑制BPDE诱导的16HBE细胞凋亡,降低胞内ROS的水平.这种抗凋亡作用可能与caspase-9/caspase-3介导的内源性线粒体途径和抑制BPDE诱导的p53和p21的蛋白表达有关.
反式二氢二醇环氧苯并[a]芘、绿原酸、细胞凋亡、活性氧、p53、p21
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R114(卫生基础科学)
中医药大学自然科学研究项目2016YSN23
2019-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
818-823
