邻苯二甲酸单乙基己基酯对小鼠胚胎干细胞多能性相关转录因子表达的影响

摘要：

[目的]研究邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对小鼠胚胎干细胞多能性维持能力的影响.[方法]不同浓度的MEHP(0、0.1、1、10、100、1000 μmol/L)处理小鼠胚胎干细胞(mESCs)4d,观察细胞形态,采用流武细胞术检测细胞凋亡指标;应用碱性磷酸酶染色法、real-time PCR及Western blot分别检测其分化情况、胚胎干细胞多能性相关转录因子SOX2、OCT4基因及其蛋白表达水平.[结果]随着MEHP染毒浓度的增加,mESCs克隆的细胞团逐渐缩小,且数量也出现减少,以1000 μmol/L组尤为明显;细胞凋亡检测结果发现,随着染毒浓度增加,凋亡率呈增加趋势,与对照组相比,仅1000 μmol/L组mESCs总细胞凋亡率[(9.58±2.02)％]的升高有统计学意义(P＜0.05).碱性磷酸酶染色结果显示,1000 μmol/L组mESCs着色较浅,甚至未着色,即出现分化倾向,而其他组mESCs均被染成深蓝色或蓝紫色.与对照组相比,100、1000 μmol/L组中SOX2、OCT4基因表达降低(均P＜0.05);1000μmol/IL组SOX2、OCT4蛋白表达降低(均P＜0.05).[结论]一定浓度MEHP对mESCs存在细胞毒性,抑制mESCs正常生长,降低mESCs中多能性相关转录因子SOX2、OCT4的表达,进而影响胚胎早期发育.

关键词：小鼠胚胎干细胞、邻苯二甲酸单乙基已基酯、细胞毒性、转录因子、SOX2、OCT4

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分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：辽宁省自然科学基金项目2015020397;辽宁省大学生创业计划项目20141064000006;沈阳医学院科学研究基金20145065,20151001

在线出版日期：2018-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：228-233