10.13213/j.cnki.jeom.2017.17123
氯化锰致人骨髓神经母细胞瘤细胞株线粒体损伤及对多巴胺分泌和PARK2表达的影响
[目的]研究氯化锰对入骨髓神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)线粒体损伤、氧化应激、多巴胺分泌及PARK2表达的影响.[方法]0、100、300、500 μunol/L浓度氯化锰染毒SH-SY5Y细胞24h后,用MTT法测细胞抑制率(反映线粒体损伤情况),石墨炉原子吸收光谱法测定细胞内锰浓度,高度水溶性四唑盐(WST-1)法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,反相高效液相色谱-荧光法测定细胞内多巴胺(DA)含量,实时荧光定量-PCR检测PARK2 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测Pakin蛋白表达.[结果]与对照组比较,MnCl2浓度为300、500 μmol/L时,细胞抑制率(线粒体损伤)增高(P<0.01).与对照组比较,染锰组细胞内锰浓度升高(P< 0.05或P<0.01).与对照组比较,MnC12浓度为300、500 μmol/L时,SOD活性和DA含量降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01);细胞PARK2 mRNA表达和Parkin蛋白表达降低(P<0.01).相关性分析显示,PARK2 mRNA表达与细胞抑制率(线粒体损伤)、细胞内锰浓度及MDA含量呈负相关,r值分别为-0.872、-0.880、-0.862(均P<0.01);PARK2 mRNA表达与SOD活性、DA含量以及Parkin蛋白表达呈正相关,r值分别为0.879、0.859、0.809(均P<0.01).[结论]氯化锰暴露可引起SH-SY5Y细胞的线粒体损伤、氧化应激、DA分泌减少和PARK2表达下降.
氯化锰、人骨髓神经母细胞瘤细胞株、超氧化物歧化酶、丙二醛、多巴胺、PARK2
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金81260420;贵州省自然科学基金黔科合sy字[2012]3140;遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室开放课题2014-2
2017-09-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
707-711,717