镉诱导HK-2细胞信号通路的蛋白磷酸化变化及缝隙连接蛋白43的作用

摘要：

[目的]探讨人肾近曲小管上皮细胞在镉(CdCl2)染毒下的信号通路蛋白磷酸化变化及缝隙连接蛋白43(Cx43)的作用. [方法]选取人肾近曲小管上皮细胞系HK-2,给予1μmol/L浓度的CdCl2染毒l0d.采用RNA干扰(siRNA)下调Cx43表达,采用Western blot检测Cx43蛋白表达,采用蛋白磷酸化芯片分析细胞信号通路蛋白磷酸化改变.[结果]在CdCl2染毒HK-2细胞10d后,蛋白磷酸化发生变化的位点有61个,发生蛋白磷酸化改变的通路有ErbB、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、T细胞受体以及B细胞受体信号通路,细胞增殖下降(P＜0.05),凋亡上升(P＜0.05);在未染毒时沉默Cx43后,相对于Cx43未沉默组,有56个磷酸化位点发生改变,发生蛋白磷酸化改变的通路有焦点黏连、ErbB、MAPK信号通路等,细胞增殖下降(P＜0.05),而细胞凋亡未发生变化(P＞0.05);而染毒后再短暂下调Cx43,相较于镉染毒组,有102个位点变化,而焦点黏连、ErbB、MAPK、凋亡和趋化因子信号通路相关蛋白磷酸化水平发生变化,细胞增殖未发生变化(P＞0.05),而细胞凋亡下降(P＜0.05). [结论]镉较长时间染毒HK-2细胞,可能会影响ErbB、MAPK、T细胞及B细胞受体信号通路,抑制细胞增殖,增加细胞凋亡;Cx43表达下降可能会通过改变焦点黏连、ErbB、MAPK、凋亡和趋化因子等信号通路的蛋白磷酸化水平,对细胞增殖与凋亡进行调控.

关键词：氯化镉、人肾近曲小管上皮细胞、蛋白磷酸化、缝隙连接蛋白43、siRNA

所属期刊栏目：33

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金项目编号:21277033

在线出版日期：2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：562-566