核因子-κB信号通路在自来水有机提取物致L02细胞炎性损伤中的作用

摘要：

[目的]观察自来水有机提取物致正常人肝细胞株(L02细胞)炎性损伤中核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况及其调控作用. [方法]采用固相萃取法提取自来水中的有机污染物.将L02细胞分别暴露于培养液(空白对照)、0.1％二甲基亚砜(溶剂对照)和0.3125、0.6250、1.2500、2.5000、5.0000L/mL自来水有机提取物中24、48、72h.采用免疫印迹方法观察NF-κB信号通路的激活情况;并使用ELISA法测定细胞培养液上清中白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平. [结果](1)L02细胞染毒24、48、72h,细胞活力在各剂量组均明显降低(P＜0.05).(2)L02细胞染毒24、48、72h,NF-κB抑制蛋白的表达水平在0.6250 L/mL以上剂量组均明显降低(P＜0.05);p65蛋白表达水平在染毒24、48h时点,仅在1.2500L/mL以上剂量组明显升高(P＜0.05),而在72h时点,0.6250L/mL以上剂量组即明显升高(P＜0.05).(3)i02细胞染毒24、48h后,0.6250 L/mL以上处理组的IL-8水平均明显升高(P＜0.05);而染毒72h,低剂量组(0.3125L/mL)的IL-8水平即可升高明显(P＜0.05);染毒24h,1.2500 L/mL以上处理组的TNF-α水平明显升高(P＜0.05);而染毒48、72h,TNF-α水平在0.6250 L/mL以上处理组即升高明显(P＜0.05).与24h染毒组比较,48、72h各染毒组的IL-8与TNF-α水平均明显升高(P＜0.05).(4)IL-8、TNF-α水平与NF-κB抑制蛋白表达水平均呈负相关关系(r=-0.851 0、-0.8180, P＜0.05),与p65蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.8160、0.8650,P＜0.05). [结论]自来水有机提取物可剂量-依赖性及时间-依赖性地激活NF-κB信号通路,诱导IL-8及TNF-t的分泌,此可能为其诱发L02细胞炎性损伤的重要原因之一.

关键词：自来水、有机提取物、正常人肝细胞(L02细胞)、核因子-κB、白介素-8、肿瘤坏死因子-α

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分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：贵州省科技厅基金编号:黔科合LH字[2014]7102;贵阳市科学技术计划项目编号:筑科合同[2013103]19号

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：313-318