10.13213/j.cnki.jeom.2016.15470
氟咯草酮诱导共培养大鼠睾丸支持-生精细胞凋亡及其可能机制
[目的]观察氟咯草酮(FLC)对共培养大鼠睾丸支持-生精细胞的影响,探究可能的机制.[方法]采用0.1%胶原酶和0.1%透明质酸酶两步酶消化法,分离得到原代睾丸支持细胞和生精细胞,共培养24h后,分别用0.01、0.10、1.00 μmol/L的FLC染毒24h.生精细胞脱落试验检测FLC对生精细胞脱落的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量-聚合酶链反应检测凋亡通路关键信号分子和p38 MAPK的mRNA表达. [结果]FLC染毒可引起支持-生精细胞共培养体系中生精细胞脱落增加,在0.01、0.10和1.00 μmol/L浓度组,生精细胞脱落百分比分别为(238.17±3.78)%,(265.89±9.51)%和(308.73±17.05)%.随着FLC浓度升高,早期凋亡率分别升高至(10.80±1.86)%,(13.52±0.72)%和(16.62±0.35)%;与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或尸<0.001).在0.10和1,00 μmol/L浓度下,FLC染毒可明显上调凋亡线粒体通路中Bax、@t-c、Caspase-9和Caspase-3的mRNA表达(P<0.05或P<0.001),同时下调BcL2的mRNA表达(P<0.05);1.00μmol/L的FLC可引起FasL与p38 MAPK的mRNA表达升高(P<0.05). [结论]FLC染毒可影响大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系中凋亡通路相关信号分子的mRNA表达,p38MAPK信号通路可能参与了FLC诱导的细胞凋亡.
氟咯草酮、雄性生殖毒性、支持-生精细胞共培养、凋亡、信号通路
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金资助项目编号:81373040
2016-03-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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