二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白-1表达:体外研究

摘要：

[目的]研究二氧化硅(SiO2)粉尘刺激对人肺泡上皮A549细胞水通道蛋白-1(AQP-1)的表达及意义.[方法]将A549细胞分为对照组、染毒组及抑制剂组.其中染毒组细胞利用50mg/L的SiO2混悬液刺激细胞,SiO2分别刺激0.5、1、2、4、8h后检测mRNA表达;SiO2分别刺激3、6、12、24h后检测蛋白表达.抑制剂组则先加入AQP-1特异性的通道抑制剂氯化汞(HgCl2)孵育3min后再加SiO2刺激2h检测mRNA,刺激6h检测蛋白表达.各组采用实时聚合酶链反应法检测AQP-1 mRNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测AQP-1蛋白表达水平. [结果]AQP-1mRNA表达:与对照组相比,SiO2刺激后的0.5、1、2、4h A549细胞AQP-1 mRNA的表达量分别是对照组的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8h时回到对照组水平(P＜0.01);抑制剂组的表达水平为相同刺激时间SiO2染毒组的65％.AQP-1蛋白表达:①免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,SiO2刺激后的3、6、12、24h A549细胞的表达量分别为对照组的1.44、2.56、1.93、1.35倍(P＜0.05或P＜0.01);抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间SiO2染毒组,为其70％(P＜0.01).②免疫细胞化学结果显示,与对照组相比,SiO2刺激后的3、6、12、24h A549细胞的表达量分别为对照组的1.17、1.49、1.29、1.07倍(P＜0.05或P＜0.01).抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间SiO2染毒组,为其71％(P＜0.01). [结论]SiO2刺激使A549细胞的AQP-1表达增高,其特异性抑制剂氯化汞可抑制SiO2刺激引起的AQP-1的表达增高,推测AQP-1可能参与了矽肺的发生发展过程.

关键词：水通道蛋白-1、二氧化硅、A549细胞、肺上皮细胞、矽肺

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分类号：R135.2;R285.5(劳动卫生)

资助基金：河北省科技厅科技支撑项目编号:10276116D

在线出版日期：2015-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：790-794