百草枯对体外培养小鼠胚胎神经干细胞增殖的影响
[目的]观察百草枯(paraquat,PQ)对体外培养小鼠胚胎神经干细胞增殖活力的影响. [方法]取10.5d小鼠胚胎进行体外神经干细胞原代培养,对培养细胞进行形态学观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色鉴定;用终浓度为0.00、0.10、1.00、10.00、100.00、1000.00μmol/L的PQ处理神经干细胞24h后,采用阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测法(Alamar Blue法)测定细胞相对存活率,分析不同浓度PQ对神经干细胞增殖的影响.用终浓度为0.00、0.10、1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L的PQ处理神经干细胞24h后,用活性氧荧光定量法(DCFH-DA法)检测细胞内活性氧(ROS)水平.[结果]免疫细胞化学检测结果显示,培养的细胞可以表达神经干细胞(NSCs)特异性蛋白;经诱导分化后的细胞可以表达神经细胞特异性蛋白;Alamar Blue法检测结果表明,与对照组相比,当PQ≥100.00μmol/L时,细胞存活率明显降低;并伴随染毒浓度的升高而进一步降低(P<0.05).ROS检测结果表明,与对照组相比,当PQ≥10.00μmol/L时.细胞内ROS水平明显提高. [结论]培养的神经细胞具备神经干细胞的基本特征;PQ可引起细胞内ROS水平的升高,并抑制神经干细胞的增殖,且存在剂量依赖性.
神经干细胞、百草枯、增殖
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R13(劳动卫生)
国家科技支撑计划2006ABI06B01;上海市自然科学基金10ZR1401700;上海市公共卫生重点学科建设项目08GWZX303;上海市学科带头人培养项目08GWD20
2011-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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