煤焦沥青提取物对BEAS-2B细胞Nrf2-Keapl/ARE通路的影响
[目的]研究煤焦沥青烟提取物对BEAS-2B细胞Nrf2、Keapl、NQOl mRNA和Nrf2蛋白表达的影响,以期探讨对抗煤焦沥青致细胞氧化损伤的分子靶标和通路.[方法]GC-Ms检测煤焦沥青烟提取物的主要成分;采用细胞急性毒性实验,根据文献以及以往的实验将煤焦沥青烟提取物分为0.00、1.25、2.50、5.00、10.00mg/五个染毒组,以BEAS-2B细胞为染毒对象进行实验;MTT法检测染毒BEAS-2B细胞生长增殖情况;RT-PCR检测Nrf2、Keapl、NQOlmRNA的表达量;Western blot测定Nrf2蛋白的表达量.[结果]煤焦沥青烟提取物主要成分中86.02%为多环芳烃类化合物;浓度为1.25mg,L时促进BEAS-2B细胞增殖,2.5~10mg/L抑制细胞增殖;染毒组Mrf2 mRNA及蛋白表达量低于对照组,而Keapl mRNA表达量高于对照组,差别均有统计学意义(P<0.05);在1.25~5.00mg/L浓度范围内,随着染毒浓度的增加,Nrf2 mRNA和蛋白表达呈递增趋势,而染毒浓度为10.00ms/L时,Nrf2 mRNA和蛋白的表达量均有所减少(P<0.05);NQOI mRNA在2.5~5.00mgCL浓度范围内随染毒浓度的增加表达水平逐渐升高.[结论]煤焦沥青烟提取物刺激BEAS-2B细胞后,可能通过Nrf2-Keapl/ARE通路来调节细胞抗氧化应激能力.
Nrf2-Keapl/ARE通路、煤焦沥青、BEAS-2B细胞
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金资助项目30972457
2011-03-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
727-730