不同预处理消毒饮用水中非挥发性有机提取物对HepG2细胞的损伤作用
[目的] 研究汉江水源水以及3种不同预处理方法(氯气、二氧化氯和臭氧)消毒水中的非挥发性有机提取物(non-volatility organic compounds,NOCs)对肝癌细胞(HepG2细胞)的损伤作用.[方法] 设氯气(Cl2+Cl2)、二氧化氯(ClO2+Cl2)、臭氧(O3+Cl2)和水源水(raw water)4个处理组以及一个阴性对照组(1% DMSO)和一个阳性对照组(Bap).各实验组分别以0.2、1、5、25、125mL/mL培养基的浓度对体外HepG2细胞进行染毒.以单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)、细胞松弛素B阻断核质分裂微核法(cytokinesis-block micronucleus)和MTT试验分别检测其对细胞DNA断裂损伤、染色体损伤和细胞存活率的影响.[结果] ①彗星试验显示,3种不同预处理方法消毒水中NOCs在5、25、125mL/mL培养基均可明显导致DNA单、双链断裂,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).相同浓度各处理组间的差异也具有统计学意义(P<0.05);碱性彗星试验显示致DNA损伤最明显的是二氧化氯组;中性彗星试验显示致DNA损伤最明显的为氯气组.②微核试验显示,3种不同预处理方法消毒水和水源水NOCs在5、25、125 mL/mL培养基均可致细胞微核的形成,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);与同浓度的臭氧组相比,氯气组在1 mL/mL培养基的细胞微核率升高(P<0.05),二氧化氯组在1 mL/mL和5mL/mL培养基的细胞微核率均明显升高(P<0.05);水源水组在1mL/mL和25mL/mL培养基时的细胞微核率显著低于同浓度的二氧化氯、氯气和臭氧组(P<0.05),在125mL/mL培养基则显著高于二氧化氯、氯气和臭氧组(P<0.05).③与对照组相比,3种不同预处理方法消毒水和水源水NOCs对体外HepG2细胞存活率有随浓度的增加而降低的趋势,在25、125mL/mL培养基差异均有统计学意义(P<0.05);④相关性研究表明,碱性OTM和中性OTM与微核率均呈正相关(r=0.697,P=0.001;r=0.575,P=0.012);细胞生存率与碱性OTM和微核率均呈负相关(r=-0.763,P=0.000;r=-0.635,P=0.005).[结论] 3种不同预处理方法消毒水中NOCs均可以导致体外HepG2细胞DNA单链和双链断裂.氯气预处理消毒水中的NOCs主要导致DNA双链的断裂,二氧化氯预处理消毒水中的NOCs主要导致DNA单链断裂.
DNA损伤、染色体损伤、氯化消毒、臭氧、HepG2细胞
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R114(卫生基础科学)
国家自然科学基金30671764和20477013
2010-06-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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