温石棉对人支气管上皮细胞BEAS-2B凋亡的影响

摘要：

[目的]研究温石棉对永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)凋亡的影响,比较单细胞凝胶电泳试验(SCGE)与流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡结果的异同. [方法]选用BEAS-2B细胞为受试物,以5、10、20、40、100、200 μg/cm2不同剂量的温石棉,分别刺激BEAS-2B细胞24、48、72h,阳性对照用石英(SiO2),阴性对照用硅灰石(WO1),用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测温石棉对BEAS-2B活力的影响.用终剂量10μg/cm2温石棉、5 μg/cm2 SiO2、20μg/cm.WO1分别刺激细胞24、48和72h后,采用SCGE和FCM检测温石棉对BEAS-2B凋亡指数和凋亡率的影响.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关半胱氨酸蛋白酶-3基因caspase-3、caspase-9的表达. [结果]10 μg/cm2温石棉可诱导BEAS-2B细胞凋亡,呈时间-效应关系(P＜0.05),采用SCGE和FCM方法检测细胞凋亡率结果一致.温石棉刺激BEAS-2B细胞24、48、72h后凋亡指数为11.7%、21.8%和34.5%,凋亡率为9.6%、17.9%和31.2%;温石棉诱导细胞caspase-3、caspase-9表达水平随时间增加而增加. [结论]温石棉可诱导BEAS-2B凋亡;SCGE和FCM均可以灵敏、快捷地检测温石棉对BEAS-2B的凋亡作用.

关键词：温石棉、人支气管上皮细胞、凋亡、单细胞凝胶电泳试验、流式细胞术

所属期刊栏目：26

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：浙江省科技厅重大与高发疾病防治技术专项基金2008C13029-2

在线出版日期：2009-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：155-158