基于GADD153启动子的环境致癌物快速筛选系统研究

摘要：

[目的]构建快速检测环境中痕量致癌物DNA损伤效应的重组人肝细胞株.[方法]构建含生长抑制与DNA损伤基因153(GADD153)启动子和萤光素酶报告基因的重组稳定转染人肝肿瘤HepG2细胞;发光检测不同致癌物对稳定转染细胞的DNA损伤效应;同时RT-PCR检测内源性GADD153 mRNA的表达;彗星试验(Comet assay)检测DNA的损伤效应.[结果]稳定转染GADD153-LUC细胞株可检出多环芳烃、芳香胺、重金属、农药等已知环境致癌物以及实际水样中的含量.检测结果与彗星试验结果相比,大多数检测下限均低于彗星试验的检测限,其中对苯并芘、氯化镉和2-氨基芴的检测灵敏度分别高于彗星试验1000、300和100倍;对Aems试验不敏感的重金属、四氯化碳、氟化钠等重组细胞株具有较高的检测灵敏性.10μmol/L的氯化镉可诱导内源性GADD153 mRNA和萤光素酶活性表达增加,相关分析表明两者具有良好的相关性(r2=0.9539).[结论]重组细胞株GADD153-LUC细胞可快速检测环境中痕量污染物的DNA损伤效应.

关键词：生长抑制与DNA损伤基因153启动子、萤光素酶报告基因、重组细胞、环境致癌物

所属期刊栏目：23

分类号：X171(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金30471433

在线出版日期：2006-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：376-380