蝎形引物PCR快速检测环境水样中沙门菌方法研究

摘要：

[目的] 以蝎形引物PCR技术为基础建立一套环境水样沙门菌的快速检测方法.[方法] 选择沙门菌himA基因设计出以荧光素(FAM)和淬灭物(DABCYL)双标记探针的茎环尾状结构构成蝎形引物,对8种沙门菌和8种非沙门菌经增菌、DNA提取后,以蝎形引物PCR方法进行检测,探讨该检测方法的可行性、特异性和灵敏度,并与普通引物PCR法检测50份环境水样进行比较.[结果] 蝎形引物PCR方法检测沙门菌,细菌密度与荧光相对强度存在着量比关系,与普通引物PCR法比较,具有快速、特异、灵敏度高的特点,在50 μl PCR反应体系中最低可检出2 cfu沙门菌.[结论] 沙门菌蝎形引物在PCR扩增中,探针可特异地与目的DNA片段杂交,使DABCYL不能有效地淬灭FAM产生的荧光,荧光可经仪器直读检出.所建立的快速检测方法可定性或定量的用于环境水样中沙门菌检测.

关键词：蝎形引物、快速检测、沙门菌、PCR

所属期刊栏目：20

分类号：R114(卫生基础科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：115-119