敲低Bmi-1对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性的影响

摘要：

目的 探讨敲低Bmi-1的表达水平对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性的影响.方法 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测4种鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、HNE1和HONE1中Bmi-1的表达,筛选出高表达Bmi-1的细胞株.设计3条针对Bmi-1 mRNA的干扰序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3),用于构建慢病毒重组载体Bmi-1-shRNA1、Bmi-1-shRNA2、Bmi-1-shRNA3,然后转染至高表达Bmi-1的细胞株中,筛选出敲低Bmi-1效果最佳的慢病毒重组载体.将筛选出的慢病毒重组载体转染至高表达Bmi-1的鼻咽癌细胞株中,使用2 Gy放射线(IR)进行照射,通过平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡情况.结果 在4种鼻咽癌细胞株中,CNE2细胞的Bmi-1 mRNA表达水平最高(P<0.05),CNE1、CNE2细胞中Bmi-1蛋白表达相对较高(P<0.05).构建的3条慢病毒重组载体Bmi-1-shRNA1、Bmi-1-shR-NA2、Bmi-1-shRNA3均可降低CNE2细胞中Bmi-1的表达,且Bmi-1-shRNA3组最低(P<0.05).在接受放射线照射后,与对照组(Bmi-1-NC+IR)相比,转染组(Bmi-1-shRNA3+IR)细胞增殖能力减弱[克隆细胞数目:(130.67±12.01)个vs.(61.00±8.19)个],细胞凋亡率增加[(13.40±0.66)％vs.(22.67±1.25)％],G2/M期细胞比例增加[(16.18±1.43)％vs.(22.34±2.00)％],差异有统计学意义(P均<0.05).结论 敲低Bmi-1表达可提高鼻咽癌CNE2细胞的放射敏感性.

关键词：鼻咽癌;Bmi-1;放射敏感性;CNE2

所属期刊栏目：27

分类号：R739.6(肿瘤学)

在线出版日期：2022-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：8-13