微小RNA?301a对肺癌细胞上皮间质转化和Smad4表达的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA?301a(miR?301a)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞上皮间质转化(EMT)和SMAD家族成员4(Smad4)表达的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测30对NSCLC组织和癌旁组织的miR?301a和Smad4水平;脂质体法向A549细胞转染miR?301a抑制剂(抑制组)或阴性对照(NC组),另以未行转染的细胞为对照组,采用QPCR、活细胞计数(CCK?8)、划痕实验、Transwell小室实验和Western blotting检测miR?301a水平、增殖活力、划痕愈合率、穿膜细胞数和Smad4水平,QPCR和Western blotting检测EMT相关标志物[上皮型钙黏蛋白(E?cad)、神经型钙黏蛋白(N?cad)和波形蛋白(Vim)]的水平,生物信息学预测和双荧光素酶报告验证miR?301a和Smad4间的靶向关系.结果 NSCLC组织的miR?301a水平为2.157±0.597,高于癌旁组织的1.023±0.229,癌组织的Smad4水平为0.648±0.162,低于癌旁组织的1.159±0.164,差异均有统计学意义(P<0.05).抑制组的miR?301a水平、划痕愈合率和穿膜细胞数分别为0.166±0.075、(31.518±4.306)％和(89.744±15.060)个,均低于对照组的1.032±0.097、(52.461±6.373)％和(139.339±17.871)个及NC组的0.981±0.089、(54.791±4.528)％和(145.243±19.782)个,而抑制组的Smad4水平为0.712±0.121,高于对照组的0.428±0.163和NC组的0.390±0.096,上述差异均有统计学意义(P<0.05).与其余两组相比,抑制组转染24、48 h的增殖活力及Vim和N?cad水平降低,而E?cad水平升高(P<0.05).Smad4野生型质粒与miR?301a模拟物共转染A549细胞后,荧光素酶活性下降(P<0.05),而Smad4突变型质粒和miR?301a模拟物共转染后,荧光素酶活性无明显变化(P>0.05).结论 NSCLC中miR?301a高表达且发挥类似癌基因的作用,下调该miRNA水平可抑制增殖和迁移侵袭能力并逆转EMT,可能通过靶向Smad4来发挥作用,有望成为NSCLC诊治的潜在新靶标.

关键词：非小细胞肺癌、微小RNA?301a、SMAD家族成员4、上皮间质转化

所属期刊栏目：25

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：103-108