微小RNA-507靶向调控VEGFC表达及对肝癌细胞生物学行为和PI3K/Akt通路的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-507 (miR-507)对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移能力及PI3K/Akt信号通路的影响并分析miR-507对血管内皮生长因子C(VEGFC)的靶向调控作用.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测2014年1月至2017年3月经病理确诊的90例肝癌患者的癌组织及癌旁组织中的miR-507和VEGFC mRNA水平;采用脂质体法向人肝癌细胞HepG2转染miR-507模拟物(过表达组)或阴性对照(NC组),QPCR检测转染48 h后的miR-507水平,MTT法比较不同处理时间(0、12、24、48 h)各组细胞的增殖情况,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验比较各组迁移情况,QPCR和Western blotting分别检测VEGFC及PI3K/Akt信号通路中p-PI3K和p-Akt的mRNA和蛋白水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-507与靶基因VEGFC间的靶向关系和结合位点.结果 QPCR检测发现肝癌组织中的miR-507水平为0.672±0.089,低于癌旁组织的1.142±0.136,VEGFC mRNA水平为1.482±0.156,高于癌旁组织的1.021±0.087,差异均有统计学意义(P＜0.05).与NC组和对照组相比,过表达组HepG2细胞的增殖活力在转染24～48 h后明显减弱(P＜0.01).过表达组的凋亡率为(17.26±1.96)％,高于NC组的(7.85±0.87)％和对照组的(8.13±0.69)％,过表达组的愈合率为(39.65±4.87)％,低于NC组的(58.18±2.73)％和对照组的(57.24±3.17)％,差异有统计学意义(P＜0.05).过表达组的p-Akt、p-PI3K和VEGFC的蛋白和mRNA水平均低于NC组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验证明VEGFC是miR-507的直接作用靶点.结论 VEGFC可能通过PI3K/Akt信号通路介导miR-507对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡与迁移能力的调控,因此miR-507可作为肝癌潜在的分子治疗靶点.

关键词：肝癌、微小RNA-507、增殖、凋亡、迁移、血管内皮生长因子C

所属期刊栏目：23

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2018-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：673-679