10.3969/j.issn.1009-0460.2018.03.002
微小RNA-145靶向调控SOX11表达及其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨微小RNA-145(miR-145)对性别决定区Y框蛋白11(SOX11)的靶向调控作用及对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测正常乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MDA-MB-231细胞中的miR-145的表达水平;选取对数生长期MDA-MB-231细胞,采用脂质体法分别转染miR-l45模拟物mimics(过表达组)或阴性对照质粒NC(阴性对照组),以未行转染的细胞为空白对照组;采用QPCR检测转染48 h后各组miR-145的表达水平,采用CCK-8和Annexin V-FITC/PI法检测各组细胞的增殖率和凋亡率,QPCR和Western blotting检测各组转染48 h后SOX11mRNA和蛋白水平,采用荧光素酶报告实验验证miR-145与SOX11的靶向调控关系.结果 HBL-100细胞的miR-145表达水平为1.047±0.026,高于MDA-MB-231细胞的0.218±0.019(P<0.05).空白对照组、阴性对照组和过表达组的miR-145表达水平分别为1.022±0.034,0.987±0.028和3.408±0.097,过表达组的miR-145表达水平高于其余两组(P<0.05);过表达组转染48、72h后的增殖率均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).空白对照组、阴性对照组和过表达组的凋亡率分别为(6.12±0.79)%、(7.12±0.82)%和(26. 11±l. 95)%,SOX11 mRNA水平分别为1.066± 0.074、1.105±0.091和0.126±0.023,SOXll蛋白水平分别为0.524±0.048、0.492±0.056和0.173±0.038,过表达组的凋亡率高于其余两组,SOX11 mRNA和蛋白水平低于其余两组(P<0.05).荧光素酶活性检测结果 显示miR-145可抑制野生型SOX11 3' UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型SOX11 3' UTR的荧光素酶活性无影响.结论 miR-145在乳腺癌细胞中表达降低,可与SOX11 3' UTR特异结合,调控乳腺癌细胞的增殖和凋亡,有可能成为乳腺癌新的生物治疗靶点.
乳腺癌、微小RNA-145、性别决定区Y框蛋白11(SOX11)、增殖、凋亡
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R737.9(肿瘤学)
2018-08-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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