p21活化酶5预测骨肉瘤化疗敏感性的实验研究

摘要：

目的 探讨骨肉瘤组织p21活化酶5(PAK5)表达与新辅助化疗敏感性的关系,从细胞水平验证PAK5是否参与调节骨肉瘤细胞化疗敏感性.方法 采用免疫组化法检测74例骨肉瘤患者活检组织中PAK5表达,分析PAK5表达与骨肉瘤临床病理特征的关系.设计合成siRNA?PAK5,分别转染进入Saos?2和MG63细胞,QPCR和Westtem blotting分别检测PAK5 mRNA和蛋白的表达情况.以不同浓度梯度的阿霉素(ADM 50、25、5、05μmol/L)、甲氨蝶呤(MTX 50、5、1、05、005μmol/L)分别处理Saos?2和MG63细胞,CCK?8法检测细胞增殖抑制率,计算转染siRNA?PAK5后骨肉瘤细胞半数抑制浓度(IC50)的差异.结果 74例骨肉瘤组织中PAK5阳性57例,阴性17例,PAK5表达与新辅助化疗后肿瘤坏死率及肺转移有关(P<005).QPCR检测转染组PAK5 mRNA分别水平下降为未转染组29%和31%;Western blotting结果显示转染组PAK5蛋白表达较未转染组下调49%和42%.转染siRNA?PAK5后,ADM作用Saos?2和MG63细胞的IC50分别由(835±007)μmol/L、(735±007)μmol/L降至(054±0004)μmol/L、(050±0002)μmol/L(P<005);MTX作用Saos?2和MG63细胞的IC50分别由(1255±0021)μmol/L、(105±0014)μmol/L降至(0606±001)μmol/L、(072±0014)μmol/L(P<005).结论 骨肉瘤PAK5表达与患者新辅助化疗敏感性相关,抑制骨肉瘤细胞PAK5表达可提高化疗敏感性.

关键词：骨肉瘤、耐药、p21活化酶5、免疫组化染色

所属期刊栏目：22

分类号：R738.6(肿瘤学)

在线出版日期：2017-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：36-40