miR-26b靶向GSK-3β发挥抗乳腺癌细胞干性的作用研究
目的探讨miR?26b对乳腺癌细胞增殖、凋亡及干性的影响并探讨其相关机制。方法采用无血清悬浮培养法培养MCF?7细胞以获得MCF?7干细胞，实时荧光定量PCR（ qRT?PCR）法检测MCF?7及其干细胞中的miR?26b水平，根据实验将MCF?7干细胞分为3组：对照组、空转染组（转染con?mimics）和miR?26b过表达组（转染miR?26b mimics），MTT法检测各组转染24、48、72及96 h的增殖能力，流式细胞仪检测各组转染后的凋亡水平及侧群（ SP ）细胞数量，体外干细胞成球培养实验检测各组转染后的成球率情况，qRT?PCR检测转染后各组干细胞标记物CD44、ALDH?1、BMI?1、OCT?4和Lin?28B的mRNA水平，生物信息学及Western blotting法分析验证miR?26b对靶基因糖原合成酶激酶?3β（ GSK?3β）的调控机制。结果MCF?7干细胞的miR?26b水平低于MCF?7细胞（ P＜0?05），且转染miR?26b mimics可升高MCF?7干细胞的miR?26b水平（ P＜0?05）；与对照组相比，过表达组转染后增殖抑制率和凋亡率均升高，SP 细胞数量和成球率均降低（ P＜0?05）；转染miR?26b mimics可导致CD44、ALDH?1、BMI?1、OCT?4和Lin?28B的mRNA水平降低（ P＜0?05）。生物信息学软件预测GSK?3β是miR?26b的潜在靶基因，转染miR?26b mimics可显著降低GSK?3β的表达，双荧光素酶报告基因检测证明miR?26b 可作用于GSK?3β基因 mRNA的3’?UTR区预测靶位。结论 MCF?7干细胞中miR?26b呈低表达，过表达miR?26b可抑制细胞增殖、诱导凋亡并负性参与了乳腺癌细胞的干性调节，可能与其下调GSK?3β表达有关。
miR-26b、乳腺癌、干性、干细胞、糖原合成酶激酶-3β
R737.9(肿瘤学)
2016-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1068-1073
