siRNA靶向抑制RP L6基因表达对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响
目的：探讨小干扰RNA（ siRNA）靶向抑制核糖体蛋白L6（ RPL6）基因表达对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件，将2条靶向抑制RPL6基因的siRNA载体片段（ siRPL6?1、siRPL6?2）分别高效转染人宫颈癌HeLa细胞（抑制组），同时设转染无义序列（siControl）的空转染组及不进行任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96 h后采用实时定量PCR（ qRT?PCR）检测RPL6表达水平以筛选抑制率高的siRPL6载体用于后续实验。噻唑蓝比色（ MTT）法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率，流式细胞术检测各组转染48、96 h后的细胞凋亡和细胞周期情况， Western blotting检测各组转染96 h后的cyclin A、CDK2和p21CIP1表达情况。结果抑制组的RPL6 mRNA水平均低于空转染组和对照组（ P＜0?05），siRPL6?2片段的干扰效率高于siRPL6?1，故后续实验选择siRPL6?2片段；与其余两组相比，抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及caspase?3活化率均升高，且G0／G1期细胞比例升高，但S期和G2／M期细胞比例均降低，以上差异均有统计学意义（ P＜0?05）；抑制组转染后的p21CIP1水平升高，cyclin A和CDK2水平降低，与空转染组和对照组的差异有统计学意义（ P＜0?05）。空转染组和对照组以上指标的差异均无统计学意义（ P＞0?05）。结论通过siRNA抑制RPL6基因表达可抑制增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞，对宫颈癌防治有一定价值。
小干扰RNA、核糖体蛋白L6、宫颈癌、HeLa细胞、增殖、凋亡
R737.33(肿瘤学)
2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
679-684
