下调miR-23a对EGFR突变非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药的影响研究
目的：探讨抑制miR?23a对EGFR T790M突变非小细胞肺癌H1975细胞吉非替尼耐药性的影响及其可能机制。方法选取吉非替尼耐药的对数生长期H1975细胞为研究样本，合成miR?23a抑制物（ miR?23a inhibitor），应用脂质体转染H1975细胞以抑制其miR?23a表达（抑制组），同时设未经转染处理的非转染组和转染无关序列的阴性对照组，实时荧光定量PCR（ qRT?PCR）验证转染效果；采用CCK?8法检测转染24、48、72及96 h后各组的增殖情况，同时于转染48 h后用吉非替尼（0?03～300μmol／L）处理各组细胞以评价对吉非替尼的药物敏感性变化情况；分别用流式细胞术检测各组的凋亡率（ FITC?Annexin V／PI双染）和细胞周期（PI单染）情况，免疫印迹法检测各组多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）及谷胱甘肽转移酶π（ GST?π）的表达变化。结果抑制组在转染24～96 h出现miR?23a水平的持续下降，其miR?23a水平均低于其余两组，转染96 h后的miR?23a水平分别为非转染组的（32?06±4?68）％和阴性对照组的（31?77±3?18）％，且吉非替尼对抑制组的半数抑制浓度（IC50）为（2?82±0?46）μmol／L，均低于其余两组，以上差异均有统计学意义（P＜0?05）；与其余两组相比，抑制组转染后增殖抑制率、凋亡率及G0／G1期比例均升高，S期、G2／M期比例均下降且耐药蛋白MRP1、LRP及GST?π蛋白水平亦下调，以上差异均有统计学意义（ P＜0?05）。结论下调miR?23a可逆转H1975细胞的吉非替尼耐药性，同时可抑制细胞增殖、诱导凋亡及细胞周期阻滞，可能与降低耐药蛋白表达有关。
非小细胞肺癌、miR-23a、吉非替尼、耐药
R734.2(肿瘤学)
2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
673-678
