真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1的构建及其在胆管癌细胞的表达

摘要：

目的 构建真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1,并在胆管癌细胞系QBC939中进行表达.方法 采用RT-PCR法从人胆管组织中克隆KAI1基因,连接T载体并测序正确后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接,经EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切鉴定后通过脂质体法转染QBC939细胞中,用荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,用免疫组化染色的方法检测细胞中KAI1的表达.结果 成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1,用脂质体法转染胆管癌细胞QBC939后,经荧光显微镜和免疫组化染色法检测可见细胞内有EGFP及KAI1的表达.结论 真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1构建成功并在胆管癌细胞QBC939中得到稳定表达,为研究KAI1对肿瘤的生物学作用以及KAI1在肿瘤基因治疗中的应用奠定了基础.

关键词：KAI1、EGFP、真核表达载体、胆管癌细胞

所属期刊栏目：16

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：105-108