小鼠 miR-214真核表达载体的构建及其鉴定

摘要：

目的：构建小鼠 miR-214的 pcDNA3．1（＋/-）真核表达载体并在 COS -7细胞中转染检测其表达。方法小鼠基因组 DNA 扩增得到 miR -214序列，将酶切后的 miR -214克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋/-），重组 pcDNA3．1（＋/-）-miR-214经过酶切和测序鉴定后转染 COS-7细胞并应用萤光定量 PCR 法检测 miR-214表达水平。结果小鼠 miR-214真核表达载体序列分析完全正确；转染 COS-7细胞后miR-214的表达水平可增加1．41倍。结论成功构建了 pcDNA3．1（＋/-）-miR-214真核表达载体并能在真核细胞中进行表达，为进一步进行 miR-214的功能研究提供了实验基础。

关键词：微RNAs、遗传载体、真核细胞、COS细胞、小鼠

分类号：R394

资助基金：国家自然科学基金资助项目81170225

在线出版日期：2013-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：634-635