10.3969/j.issn.1672-6790.2010.02.001
甲基化特异性PCR联合结合重亚硫酸盐限制性内切酶法在胃癌抑癌基因甲基化检测中的应用
目的 探讨甲基化特异性PCR(MSP)方法检测胃癌组织中抑癌基因甲基化的准确性,联合应用MSP方法与结合重亚硫酸盐限制性内切酶法(COBRA)检测抑癌基因甲基化状态的意义.方法 采用MSP检测胃癌组织抑癌基因Runx3启动子区甲基化的状态,随后再采用COBRA检测胃癌组织标本的甲基化状态.分析两种方法检测结果的关系.结果 经MSP方法检测54例肿瘤组织中共有30例标本发生Runx3基因启动子区异常甲基化,甲基化阳性率为55.6%.经COBRA方法检测54例肿瘤组织中有27例出现酶切条带即存在甲基化,甲基化阳性率为50.0%.经COBRA方法检测,在MSP方法检测的30例阳性标本中有3例未出现酶切条带即为假阳性.在MSP方法检测Runx3基因甲基化阴性的24例标本中,经COBRA方法检测,Runx3基因甲基化阴性的标本亦为24例.两种检测方法检测结果的阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 甲基化特异性PCR方法在检测胃癌抑癌基因甲基化状态的研究中具有较高的灵敏度,COBRA方法可以检测出MSP方法中的假阳性标本,联合应用两种方法检测胃癌组织中抑癌基因的甲基化状态会使实验结果更可靠、准确.
胃肿瘤、DNA甲基化、聚合酶链反应、基因、肿瘤抑制、限制性内切酶图谱法
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R735.2(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30672383
2010-06-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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