microRNA-204抑制强直性脊柱炎成纤维细胞成骨分化

摘要：

目的 探讨microRNA-204(miR-204)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)成纤维细胞中的表达及其对BMP-2和TGF-β1诱导的成骨分化的功能及其可能的作用机制.方法 收集5例骨AS和5例非AS的髋关节囊组织;采用原代细胞培养方法分离培养成纤维细胞;细胞实验分为4组,分别为正常对照组、AS对照组、AS+ miRNA-NC组和AS+ miR-204组;除了正常对照组和AS对照组外,AS+ miRNA-NC组、AS+ miR-204组的培养基中分别加入7 ng/ml的BMP-2和5 ng/ml的TGF-β1;miRNA-NC和miR-204 mimics采用脂质体Lipofectamine 2000进行转染;实时荧光定量PCR法检测miR-204、Ⅰ型胶原(c0l-lagen type Ⅰ,Col Ⅰ)、骨钙素(osteopontin,OPN)和核心结合蛋白因子2(Runx2) mRNA的表达水平;Western blot法检测Runx2 蛋白表达水平;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性;双荧光素酶报告基因检测miR-204与Runx2的靶向调控关系.结果 miR-204在AS来源的成纤维细胞及BMP-2和TGF-β1处理的细胞中表达降低.过表达miR-204可以显著抑制BMP-2和TGF-β1诱导的ALP活性增高,Col Ⅰ和OPN的表达水平上升.另外,miR-204可以靶向调控Runx2,并且抑制Runx2的表达水平.结论 miR-204与AS成纤维细胞成骨分化密切相关,其可以通过靶向调控Runx2的表达来调节成纤维细胞的骨化,为AS的治疗提供潜在的治疗靶点.

关键词：强直性脊柱炎、miR-204、成骨分化、成纤维细胞

所属期刊栏目：31

分类号：R681.51(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2016-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1374-1378